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高效液相色譜柱的組成和反沖方法

更新時(shí)間:2022-08-14      點(diǎn)擊次數(shù):6621
  高效液相色譜柱由柱管、壓帽、卡套(密封環(huán))、篩板(濾片)、接頭、螺絲等組成。柱管多用不銹鋼制成,壓力不高于70Kg/cm2時(shí),也可采用厚壁玻璃或石英管,管內(nèi)壁要求有很高的光潔度。為提高柱效,減小管壁效應(yīng),不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光。也有人在不銹鋼柱內(nèi)壁涂敷氟塑料以提高內(nèi)壁的光潔度,其效果與拋光相同還有使用熔融硅或玻璃襯里的,用于細(xì)管柱。色譜柱兩端的柱接頭內(nèi)裝有篩板,是燒結(jié)不銹鋼或鈦合金。取決于填料粒度,目的是防止填料漏出,柱內(nèi)徑一般是根據(jù)柱長、填料粒徑和折合流速來確定,目的是為了避免管壁效應(yīng)。
  高效液相色譜柱要如何反沖:
  液相色譜柱反沖時(shí)遵循的原則是用比流動相洗脫能力更強(qiáng)的溶劑沖洗。
  反相色譜柱可以選擇極性較小的溶劑反向沖洗,推薦如下沖洗方法:
  水→甲醇→乙腈→異丙醇→二氯甲烷→異丙醇→乙腈
  正相色譜柱可以選擇極性較大的溶劑反向沖洗,沖洗方法如下:
  正己烷→二氯甲烷→乙酸乙酯→異丙醇→乙腈→甲醇
  如果流動相中含有緩沖鹽,在運(yùn)行序列過程中出現(xiàn)柱壓異常升高的現(xiàn)象,則發(fā)生了緩沖鹽在色譜柱柱床上析出,推薦采用如下維護(hù)方法:
  1、用甲醇/水反向沖洗色譜柱60個(gè)柱體積;
  2、用甲醇/水反向沖洗色譜柱過夜。

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